Cycle cellulaire par marquage de l'ADN à l'iodure de propidium

SOLUTION D'IP:

25 µg/ml d'iodure de propidium.

0,1% poids/volume de tri-sodium citrate dihydrate.

10% volume/volume de solution de RNase (RNase-A, 1mg/ml dans du PBS avec 0,5 mM EDTA).

0,1% volume/volume de TRITON X-100.

eau distillée.

PROTOCOLE:

Centrifuger les cellules (400g, 5 min à 5°C).

Mettre le culot cellulaire sur la glace pendant 10 minutes (minimum).

Ajouter 900 µl de solution froide d'IP.

Laisser une nuit au frigo.

COMMENTAIRE:

Cette technique peut être précédée d'un marquage membranaire en simple immunofluorescence (FITC).

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Source :

Cytometry 11 : 837-844 (1990) :

Simultaneous Measurement of DNA Content and Cell-Surface Immunofluorescence of human bone marrow cells using a single laser flow cytometer. P P T Brons, Pennings A H M, Haanen C, Wessels H M C, Boezeman J B M