Présentations Powerpoint :
Préparation du multimarquage : design panel : O. Jaen (Beckman Coulter)
Principe des compensations de fluorescence : Benoit Dupont (Beckman Coulter)
Principes de la cytométrie : application à l'analyse de la mortalité, de la transduction et des sécrétions de cytokines (en anglais)

Bibliographie :
Flow Cytometry APC-Tandem Dyes Are Degraded Through a Cell-Dependent Mechanism
Frequency of regulatory T cells in peripheral blood and in tumour-infiltrating lymphocytes correlates with poor prognosis in renal cell carcinoma
CD62L expression identifies a unique subset of polyfunctional CD56dim NK cells
Considerations for the Control of Background Fluorescence in Clinical Flow Cytometry
Amine-Reactive Dyes for Dead Cell Discrimination in Fixed Samples
How Many Events Is Enough? Are You Positive?
How Flow Cytometry is Changing the Study of TB Immunology and Clinical Diagnosis
CD127 expression inversely correlates with FoxP3 and suppressive function of human CD4+ T reg cells
Expression of interleukin (IL)-2 and IL-7 receptors discriminates between human regulatory and activated T cells
Seventeen-colour flow cytometry: unravelling the immune system
Nine-Color Flow Cytometry for Accurate Measurement of T Cell Subsets and Cytokine Responses. Part I: Panel Design by an Empiric Approach
Nine-Color Flow Cytometry for Accurate Measurement of T Cell Subsets and Cytokine Responses. Part II: Panel Performance Across Different Instrument Platforms
Optimizing a Multi-colour Immunophenotyping Assay
Phenotype and Function of Human T Lymphocyte Subsets: Consensus and Issues
Rare-Event Analysis in Flow Cytometry
Making the invisible visible: Rare event detection by flow cytometry using 10 colors in 65 million events
A Single Naive CD8+ T Cell Precursor Can Develop into Diverse Effector and Memory Subsets

Atelier Cellules Rares :


Outil d'analyse des cellules rares par cytométrie en flux.
Cet outil permet de calculer le nombre de cellules à analyser pour avoir un résultat statistiquement fiable pour un pourcentage donné.

Formule mathématique permettant le nombre de cellules à passer pour avoir un résultat statistiquement fiable:

X% de précision = 100 / sqrt(N) d'où

N=(100/X)^2 =nombre de cellules rares trouvées.

Si la population qu'on recherche représente z % du total:

(N/ z) = Nombre de cellules à analyser.

Exemple pour avoir 95% de fiabilité :  100-95=100/ sqrt(N) => N=(100/(100-95)^2=400 cellules d'intéret trouvées
=> si cette population représente 0,002% du total alors il faut passer (400/0,00002)=20 000 000 de cellules à analyser.

Formule sous format Excel : ICI