Localisation

1 Aurora CS, 4 lasers (407 nm, 488 nm, 561 nm,  638 nm), 30 fluorescences, unité de clonage, PSM.   1 Aurora Analyseur, 4 lasers (407 nm, 488 nm, 561 nm,  638 nm), 30 fluorescences, PSM     1 Gallios (3 lasers 488, 638, 405 nm, 10 couleurs, passeur d'échantillons)    1 Canto II (3 lasers 488, 638, 405 nm, 8 couleurs, passeur d'échantillons)

Plusieurs postes de retraitement des données avec les logiciels suivants : FlowJo, Diva, Kaluza.

1 salle blanche en confinement L2 pour le tri cellulaire

Il est demandé, pour chaque publication ayant nécessité l'utilisation de l'appareil, que le service figure dans les remerciements.

Objectif :

L’objectif initial était d’ouvrir un centre de cytométrie de flux performant, pouvant assurer analyses et tris multiparamétriques. Intégré dans l’IRMB et faisant partie de MRI, le laboratoire participe à la réalisation de travaux des laboratoires régionaux. Ce laboratoire, qui ne possède pas de thématique propre est largement ouvert vers la communauté scientifique régionale : INSERM, CNRS, Université des Sciences, Faculté de Pharmacie, IFREMER, IRD, CIRAD, INRA, ENSAM… Ces dernières années, l’évolution technique du matériel a conduit de nombreux laboratoires à analyser et purifier des cellules au moyen des cytométres en flux pour mieux clarifier leur rôle ou analyser leur contenu (protéine, ADN, ARN…), qu’elles soient humaines, animales, végétales, bactériennes, marines… Les besoins des laboratoires croissant avec l’évolution des technologies, de nombreuses études nécessitent l’utilisation d’analyseurs et de trieurs hautes performances.

Activité :

Le service de cytométrie en flux est une structure qui fonctionne en service commun.

Ce qui distingue la CMF des autres techniques préparatives est qu’elle offre la possibilité de travailler simultanément sur plusieurs paramètres. Aucune autre méthode, qu’elle soit physico-chimique (centrifugation en gradient, élutriation) ou immunologique (panning, colonnes, rosettes) n’offre cette polyvalence. Il est ainsi possible d’analyser et de trier des populations sur une base multiparamètrique : deux morphologies et jusqu’à dix fluorescences sur les appareils du commerce de dernière génération.

Dans l'immédiat les thématiques suivantes (faisant appel à l’analyse par cytométrie en flux) sont abordées en réponse aux demandes exprimées:

+l’étude de la prolifération de divers types cellulaires (lignées, lymphocytes...) par le marquage de l’ADN.

+l’analyse de populations cellulaires marquées avec des anticorps monoclonaux (multiples marquages).

+ la quantification de protéines membranaires par l’utilisation de standards calibrés (QIFIKIT).

+ étude de l’apoptose.

+l’étude de l’expression de protéines en fonction du cycle cellulaire.

+l’étude du contenu en ADN de plantes (citron, café, riz, pétunia...) au moyen des colorants utilisés pour le marquage de l’ADN précédemment cités.

+Le tri cellulaire fait appel aux techniques d’analyse précédemment citées.

Pour plus de détails sur ces thématiques, rendez-vous ICI.

Expertise :

Le laboratoire a participé aux tests de divers appareils des 2 plus gros constructeurs de cytomètres que sont Becton Dickinson et Beckman Coulter.

 

1991 :    Achat du FACScan en complément du trieur Ortho 50H

1993 :    Remplacement du trieur Ortho par un trieur FACSVantage

              Validation du programme Cellquest  (béta-test pour la société Becton Dickinson)

2000 :    Mise à jour du FACSVantage en FACSVantage SE TurboSort (Financé par l’IGM)

              Acquisition de l’unité de clonage du trieur (Financée en partie par une équipe de l’IGH)

2001 :    Mise à jour des postes informatiques d’acquisition

2004 :    Remplacement du laser UV du trieur de cellules
2005 :    Achat du trieur FACSAria
2008 :    Déménagement du laboratoire au sein du CHU dans l'Institut de Recherche en Biothérapies.
              Arrêt du FACSVantage
2009 :    Arrivée de 2 nouveaux analyseurs Beckman Coulter : Cyan et Gallios
2010 :    Mise à la retraite du FACScan après 15 ans de bons et loyaux services.
2012 :    Certification ISO9001
2014 :    Upgrade fluidique du FACSAria qui devient un FACSAria IIIu
2015 :    Arrivée du FACSCanto II, double certification ISO9001 et NF X 50-900, Installation d'un laser Jaune dans le FACSaria IIIu.
2016 :    Mise sous PSM Noroit du FACSAria IIIu

2019 :    Sortie du Cyan du plateau
2022 :    Sortie de l'Aria IIIu du plateau
              Arrivée du trieur Cytek Aurora CS 4 lasers
2023 :    Arrivée de l'analyseur Cytek Aurora 4 lasers